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2024-03-07 20:36:19

丙二醇甲醚醋酸酯 - 搜狗百科

醚醋酸酯 - 搜狗百科丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)，也叫丙二醇单甲醚乙酸酯，分子式为C6H12O3，是一种高级溶剂，其分子中既有醚键，又有羰基，羰基又形成了酯的结构，同时又含有烷基。主要用于油墨、油漆、墨水、纺织染料、纺织油剂的溶剂，也可用于液晶显示器生产中的清洗剂。网页微信知乎图片视频医疗汉语问问百科更多»登录帮助首页任务任务中心公益百科积分商城个人中心丙二醇甲醚醋酸酯编辑词条添加义项同义词收藏分享分享到QQ空间新浪微博丙二醇甲醚醋酸酯（PMA)，也叫丙二醇单甲醚乙酸酯，分子式为C6H12O3，是一种高级溶剂，其分子中既有醚键，又有羰基，羰基又形成了酯的结构，同时又含有烷基。主要用于油墨、油漆、墨水、纺织染料、纺织油剂的溶剂，也可用于液晶显示器生产中的清洗剂。中文名丙二醇甲醚醋酸酯展开别称乙酸-1-甲氧基-2-丙基酯展开分子量132.16[1]展开EINECS登录203-603-9[1]展开沸点146℃[1]展开密度0.96g/cm³[1]展开闪点47.9 ℃[1]展开安全性描述S25；S45；S53[1]展开危险性符号 T；Xi[1]展开英文名2-Acetoxy-1-methoxypropane展开化学式C6H12O3[1]展开CAS登录号108-65-6[1]展开熔点-87℃ [1]展开水溶性溶于水[1]展开外观无色透明液体[1]展开应用它是涂料行业中一种为了提高涂膜强度而不可缺少的辅助溶剂[1]展开危险性描述R10；R36；R61[1]展开UN危险货物编号3271[1]展开展开参考资料：1. 丙二醇单甲醚乙酸酯化源网[引用日期2023-06-02]词条标签：化工醋酸酯免责声明搜狗百科词条内容由用户共同创建和维护，不代表搜狗百科立场。如果您需要医学、法律、投资理财等专业领域的建议，我们强烈建议您独自对内容的可信性进行评估，并咨询相关专业人士。词条信息词条浏览：63639次最近更新：23.06.03编辑次数：14次创建者：精诚所突出贡献者：新手指引了解百科编辑规范用户体系商城兑换问题解答关于审核关于编辑关于创建常见问题意见反馈及投诉举报与质疑举报非法用户未通过申诉反馈侵权信息对外合作邮件合作任务领取官方微博微信公众号搜索词条编辑词条收藏查看我的收藏分享分享到QQ空间新浪微博投诉登录企业推广免责声明用户协议隐私政策编辑帮助意见反馈及投诉© SOGOU.COM 京ICP备11001839号-1 京公网安备110000020000

如何将THP-1 单核细胞用PMA诱导成巨噬细胞? - 知乎

如何将THP-1 单核细胞用PMA诱导成巨噬细胞? - 知乎首页知乎知学堂发现等你来答切换模式登录/注册生物学细胞生物巨噬细胞如何将THP-1 单核细胞用PMA诱导成巨噬细胞?诱导的时间和PMA的使用剂量，诱导成功后是否可以正常的传代冻存，当成巨噬细胞使用？还是每次实验前要重新诱导？显示全部关注者5被浏览29,536关注问题写回答邀请回答好问题1 条评论分享2 个回答默认排序SUNNCELL尚恩生物细胞系/原代细胞/细胞培养基/辅助试剂/STR鉴定关注THP-1（人单核细胞白血病细胞）来自一位急性单核细胞白血病患者的血液，在实验研究中，常常诱导其分化为巨噬细胞和泡沫细胞。本期普诺赛为大家总结了分化类型及其具体实验操作。THP-1分化为巨噬细胞巨噬细胞是重要的免疫效应细胞，在固有免疫和适应性免疫应答中发挥重要作用。同时，它也是高度异质性的细胞，受局部微环境的影响，可活化为不同的类型，展现出不同的表型和功能。由于巨噬细胞在不同的组织环境和生理、病理条件下的异质性，巨噬细胞被分为两种主要类型：M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞[1]。THP-1细胞通常用佛波酯（PMA）诱导分化为巨噬细胞，然后在PMA仍然存在的情况下：脂多糖(LPS)(100ng/mL)、IFN-γ(20ng/mL)培养48h，诱导其向M1极化；IL-4(20ng/mL)、IL-13(20ng/mL)培养48h，诱导其向M2极化；最后，在无刺激物和无PMA的情况下，用无血清RPMI-1640培养基重悬细胞，可保持72h[2]。图1. 巨噬细胞分化为M1和M2PMA诱导THP-1步骤：将处于对数生长期的THP-1细胞离心，用RPMI-1640培养基重悬；加入PMA，显微镜下细胞计数，调整THP-1细胞密度为5*10^5/mL；使PMA终浓度为100ng/mL，将细胞种入六孔板，每孔加入细胞2mL；48h后，显微镜下观察巨噬细胞构建成功。单核细胞THP-1用PMA诱导后，由悬浮式生长变成贴壁生长，由圆形变成不规则形态，体积进一步增大，细胞浆疏松，细胞核增大明显，可见大量明显细胞器，胞膜周围可见少量突起[3]。图2. THP-1经PMA诱导分化为巨噬细胞THP-1分化为泡沫细胞THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后，可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞，这也是动脉粥样硬化产生的原因。将THP-1细胞经PMA诱导为巨噬细胞后，可用RPMI-1640培养基配制氧化修饰低密度脂蛋白OX-LDL，使其终浓度为80mg/L，加入六孔板中，每孔量为2mL，干预24h。油红O染色步骤：吸出各孔中培养基，PBS漂洗三次；4%多聚甲醛37℃固定30min；PBS漂洗两次，油红O（1mL/孔）37℃染色20-30min；60%异丙醇漂洗5s，最好不要超过10s；马上用PBS漂洗2-3次。单核细胞源性巨噬细胞用OX-LDL诱导24h后, 倒置显微镜下观察，巨噬细胞体积进一步增大，细胞膜突触形成明显，胞浆增加，疏松化，可见大量细胞器及吞噬的脂质小滴。油红O染色后，细胞浆内可见大量红染物质[4]。图3. 巨噬细胞经OX-LDL诱导后用油红O染色发布于 2022-12-05 16:46赞同 10添加评论分享收藏喜欢收起乔默 CHAMOT国产高活性低内毒素重组细胞因子生产商关注单核细胞系来源巨噬细胞极化及鉴定（THP-1 &RAW264.7）THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者的外周血中分离得到的单核细胞系，为悬浮细胞，它在调控组织稳态、炎症反应等方面的研究发挥着重要作用，该细胞株已被广泛用于研究单核/巨噬细胞的功能机制、信号通路、营养和药物转运、免疫应答等方面。相对于人外周血单核细胞（PBMC），THP-1更易在实验室中培养和扩增，且具有更稳定的基因背景，不存在PBMC的个体差异性问题，利于实验结果的重现。RAW264.7细胞是小鼠单核巨噬细胞白血病细胞，为贴壁细胞，是从用Abelson鼠科白血病病毒诱导的雄性小鼠的肿瘤中建立的单核/巨噬样细胞系。RAW264.7细胞是破骨细胞、炎症研究最常用的体外模型之一。巨噬细胞是免疫系统中的重要组成部分，在保护机体免受感染和维持组织平衡方面等发挥着关键作用。为了更便利地研究巨噬细胞的功能和机制，科学工作者们创造了一种不需要从患者或动物采集组织的方法，即是选择商业化的人和小鼠单核细胞系，如THP-1细胞（急性单核细胞白血病）、RAW264.7细胞（小鼠白血病单核巨噬细胞）等。一、THP-1细胞来源巨噬细胞极化及鉴定1.1 用RPMI 1640完全培养基(1640培养基+10%FBS+双抗)重悬细胞至2-10×10^5/ml，加入终浓度为100ng/ml的PMA，24孔培养板中加入1ml细胞悬液，诱导分化24h，替换成新鲜RPMI 1640完全培养基，继续培养24h。1.2 M1方向极化：加入10ng/ml的LPS和20ng/ml的Human IFN-γ，极化24h；1.3 M2方向极化：加入20ng/ml的Human IL-4和20 ng/ml的Human IL-13，极化24h；1.4 细胞鉴定：通过qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等方法进行鉴定。（M1标记物如：CD80, iNOS, IL-1β, IL-6, CXCL1等；M2标记物如 CD206, CD163, IL-10, CCL18，Arg1等）二、RAW264.7细胞来源巨噬细胞极化及鉴定2.1 用DMEM完全培养基(DMEM培养基+10%FBS+双抗)重悬细胞至2-10×10^5/ml，24孔培养板中加入1ml细胞悬液，培养过夜。2.2 M1方向极化：加入10ng/ml的LPS和20ng/ml的Mouse IFN-γ，极化24h；2.3 M2方向极化：加入20ng/ml的Mouse IL-4，极化24h；2.4. 细胞鉴定：通过流式细胞术、ELISA、qRT-PCR等方法进行鉴定。（M1标记物如：CD80, iNOS, IL-1β, IL-6, CXCL1等；M2标记物如 CD206, CD163, IL-10, CCL18，Ar1g1等）*以上流程仅供参考，具体实验需跟情况做调整。所需细胞因子：产品编号产品名称规格目录价CM081-20HPRecombinant IFN gamma，Human，AF20 μg￥600CM081-100HPRecombinant IFN gamma，Human，AF100 μg￥1,500CM081-500HPRecombinant IFN gamma，Human，AF500 μg￥4,500CM081-1000HPRecombinant IFN gamma，Human，AF1 mg￥7,000CM006-5HPRecombinant IL-4，Human，AF5 μg￥600CM006-20HPRecombinant IL-4，Human，AF20 μg￥1,500CM006-100HPRecombinant IL-4，Human，AF100 μg￥4,500CM006-500HPRecombinant IL-4，Human，AF500 μg￥13,000CM006-1000HPRecombinant IL-4，Human，AF1 mg￥20,000CM015-5HPRecombinant IL-13，Human，AF5 μg￥600CM015-20HPRecombinant IL-13，Human，AF20 μg￥1,500CM015-100HPRecombinant IL-13，Human，AF100 μg￥4,500CM015-500HPRecombinant IL-13，Human，AF500 μg￥13,000CM015-1000HPRecombinant IL-13，Human，AF1 mg￥20,000CM052-20MPRecombinant IFN gamma，Mouse，AF20 μg￥600CM052-100MPRecombinant IFN gamma，Mouse，AF100 μg￥1,500CM052-500MPRecombinant IFN gamma，Mouse，AF500 μg￥4,500CM052-1000MPRecombinant IFN gamma，Mouse，AF1 mg￥7,000CM005-5MPRecombinant IL-4，Mouse，AF5 μg￥600CM005-20MPRecombinant IL-4，Mouse，AF20 μg￥1,500CM005-100MPRecombinant IL-4，Mouse，AF100 μg￥4,500CM005-500MPRecombinant IL-4，Mouse，AF500 μg￥13,000CM005-1000MPRecombinant IL-4，Mouse，AF1 mg￥20,000参考文献1. Marie Genin, Francois Clement, Antoine Fattaccioli, etc. M1 and M2 macrophages derived from THP-1 cells differentially modulate the response of cancer cells to etoposide.BMC Cancer. 2015 Aug 8:15:577.2. Xuan Huang, Yong Li, Mingui Fu, etc. Polarizing Macrophages In Vitro.Methods Mol Biol. 2018:1784:119-126. 3. Ingrid Elisia, Han Bee Pae, Vivian Lam, etc. Comparison of RAW264.7, human whole blood and PBMC assays to screen for immunomodulators.J Immunol Methods. 2018 Jan:452:26-31.4. Hiromi Shiratori, Carmen Feinweber, Sonja Luckhardt, etc. THP-1 and human peripheral blood mononuclear cell-derived macrophages differ in their capacity to polarize in vitro. Mol Immunol. 2017 Aug:88:58-68.5. F Kianoush, M Nematollahi, J D Waterfield, etc. Regulation of RAW264.7 macrophage polarization on smooth and rough surface topographies by galectin-3. J Biomed Mater Res A. 2017 Sep;105(9):2499-2509.6. 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(IF 9.968) (Mouse IFN-γ)· Interferon-α regulates abnormally increased expression of RSAD2 in Th17 and Tfh cells in systemic lupus erythematosus patients.Eur J Immunol. 2023 May 13;e2350420. (IF 6.688) (Human IFN-α, IFN-β, IFN-γ)发布于 2024-02-22 14:07赞同添加评论分享收藏喜欢收起

Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA，佛波酯) - 仅供科研 | PKC激活剂 | MCE

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Phorbol 12-myristate 13-acetate

(Synonyms: 佛波酯; PMA; TPA; Phorbol myristate acetate)

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Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) 是一种佛波酯，是蛋白激酶 C (PKC) 和 SphK 的激活剂。Phorbol 12-myristate 13-acetate 是 NF-κB 激活剂。Phorbol 12-myristate 13-acetate 可诱导 THP1 细胞分化。

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Phorbol 12-myristate 13-acetate Chemical Structure

CAS No. : 16561-29-8

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Phorbol 12-myristate 13-acetate purchased from MCE. Usage Cited in:

Pharmacol Res. 2019 Apr;142:1-13.

[Abstract]

Total lysates from cells are analyzed for the expression of MMP-2 and MMP-9 by Western blot analysis in the treatment of different concentrations of PMA and PDD.

Phorbol 12-myristate 13-acetate purchased from MCE. Usage Cited in:

Pharmacol Res. 2019 Apr;142:1-13.

[Abstract]

MDA-MB-231 cells are pretreated with PPD for 24 h followed by exposure to 50 ng/mL of PMA for 30 min. The whole cell lysates are analyzed by Western blot for the activation of MAPK.

Phorbol 12-myristate 13-acetate purchased from MCE. Usage Cited in:

Front Mol Neurosci. 2017 Aug 7;10:247.

[Abstract]

Bar graphs show levels of GABAAR-α2 mRNA and GABAAR-α2 protein in BLA of control mice treated with BLA-injection of H89 or GF109203X (GFX); in MPTP-mice treated with BLA-injection of PMA, or the co-administration of quinpirole and H89 (quin/+H89) or GF109203X (quin/+GFX).

Phorbol 12-myristate 13-acetate 相关产品

•相关化合物库:

Natural Product Library Plus

Bioactive Compound Library Plus

Epigenetics Compound Library

Immunology/Inflammation Compound Library

Kinase Inhibitor Library

NF-κB Signaling Compound Library

Stem Cell Signaling Compound Library

TGF-beta/Smad Compound Library

Natural Product Library

Anti-Aging Compound Library

Antioxidant Compound Library

Lipid Compound Library

Oxygen Sensing Compound Library

Pyroptosis Compound Library

Cytoskeleton Compound Library

Traditional Chinese Medicine Active Compound Library

Anti-Pancreatic Cancer Compound Library

Anti-Cancer Metabolism Compound Library

Transcription Factor-Targeted Library

Animal Disease Model Inducer Library

Anti-inflammatory Traditional Chinese Medicine Active Compound Library

Plant-Sourced Natural Product Library

Human Metabolite Library

Coagulation and Anti-coagulation Compound Library

Pain-Related Compound Library

Membrane Protein-targeted Compound Library

Multi-Target Compound Library

Radioprotector Library

•同靶点产品:

•同靶点蛋白产品:

查看 PKC 亚型特异性产品:

查看所有亚型

PKC

PKCα

PKCβ

PKCγ

PKCδ

PKCε

PKCη

PKCζ

PKCθ

PKCμ

PKCι

查看 NF-κB 亚型特异性产品:

查看所有亚型

NF-κB

NF-κB1/p50

RelA/p65

RelB

c-Rel

生物活性

实验参考方法

纯度 & 产品资料

参考文献

生物活性

Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), a phorbol ester, is a dual SphK and protein kinase C (PKC) activator[1][2]. Phorbol 12-myristate 13-acetate is a NF-κB activator. Phorbol 12-myristate 13-acetate induces differentiation in THP-1 cells[3][7].

IC50 & Target[1][7]

PKC

11.7 nM (EC50)

NF-κB

体外研究(In Vitro)

为了检查 PKC 在 p38MAPK 磷酸化中的作用，使用 PKC 激活剂 Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) (100 nM) 刺激细胞，该激活剂模拟 PKC 的天然激活剂 DAG 与 PKC 的 C1 区域的结合。在两种细胞类型中观察到 PMA 对 p38MAPK 的磷酸化，类似于在 αT3-1 细胞中观察到的 GnRH，即缓慢持续激活 (30 分钟时分别为 3.2 倍和 3.6 倍)。PKCs 的不同定位可以解释 GnRH 和 PMA 激活的 PKCs 在 p38MAPK 磷酸化中发挥不同作用。一般来说，αT3-1 细胞中 GnRH 和 PMA 刺激 p38MAPK 磷酸化是由电压门控 Ca2+ 通道和 Ca2+ 动员介导的，而在分化的 LβT2 促性腺激素细胞中，它仅由 Ca2+ 动员介导[2]。THP-1 细胞通过在 PMA (200 ng/mL；1-5 天) 存在下孵育分化成巨噬细胞样细胞 (THP-1 巨噬细胞)，从而导致以形态变化和细胞表面表达增加为特征的巨噬细胞样表型 CD11 和 CD14[3]。在单核细胞系 THP-1 中，根据粘附、增殖丧失、乳胶珠的吞噬作用，PMA 导致比 VD3 更分化的表型，以及 CD11b 和 CD14 的表达[5]。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Phorbol 12-myristate 13-acetate 相关抗体:

体内研究(In Vivo)

Phorbol 12-myristate 13-acetate 可用于动物建模，构建湿疹样模型。Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) 是一种 PKC 激动剂，可逆转 5-羟基癸酸 (5-HD) 引起的损伤。因此，mitoKATP 的激活通过 PKC 通路保护了 SOD 和 MDA 中的线粒体功能[4]。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

616.83

Formula

C36H56O8

CAS 号

16561-29-8

性状

固体

颜色

White to off-white

中文名称

佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯；(12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐；佛波酯

结构分类

Ketones, Aldehydes, Acids

初始来源

植物

大戟科

巴豆

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

溶解性数据

In Vitro:

DMSO 中的溶解度 : 100 mg/mL (162.12 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的 DMSO)

Ethanol 中的溶解度 : 100 mg/mL (162.12 mM; 超声助溶)

配制储备液

浓度

溶剂体积

质量

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.6212 mL

8.1060 mL

16.2119 mL

5 mM

0.3242 mL

1.6212 mL

3.2424 mL

10 mM

0.1621 mL

0.8106 mL

1.6212 mL

查看完整储备液配制表

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

摩尔计算器

稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量

μg

浓度

μM

体积

μL

分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

μM

体积 (start)

μL

浓度 (final)

μM

体积 (final)

μL

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；

以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

方案一

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 40% PEG300 5% Tween-80 45% SalineSolubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.05 mM); 澄清溶液

此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水定容至 1 mL。生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。

方案二

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 90% (20% SBE-β-CD in Saline)Solubility: 2.5 mg/mL (4.05 mM); 悬浊液; 超声助溶

此方案可获得 2.5 mg/mL的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。20% SBE-β-CD in Saline 的配制（4°C，储存一周）：2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。

方案三

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 90% Corn OilSolubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.05 mM); 澄清溶液

此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

方案四

请依序添加每种溶剂： 10% EtOH 40% PEG300 5% Tween-80 45% SalineSolubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.05 mM); 澄清溶液

此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水定容至 1 mL。生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。

方案五

请依序添加每种溶剂： 10% EtOH 90% (20% SBE-β-CD in Saline)Solubility: 2.5 mg/mL (4.05 mM); 悬浊液; 超声助溶

此方案可获得 2.5 mg/mL的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。20% SBE-β-CD in Saline 的配制（4°C，储存一周）：2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。

方案六

请依序添加每种溶剂： 10% EtOH 90% Corn OilSolubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.05 mM); 澄清溶液

此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 900 μL 玉米油中，混合均匀。

扫码获得动物溶解方案

动物溶解方案计算器

请输入动物实验的基本信息：

给药剂量 mg/kg

动物的平均体重 g

每只动物的给药体积 μL

动物数量只

由于实验过程有损耗，建议您多配一只动物的量

请输入您的动物体内配方组成：

DMSO

Tween-80

Saline

如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠，建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。

方案所需助溶剂包括：DMSO，

，均可在 MCE 网站选购。

，Tween 80，均可在 MCE 网站选购。

计算结果

工作液所需浓度 :

mg/mL

储备液配制方法 :

药物溶于

μL

DMSO（母液浓度为 mg/mL）。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度，以下方案仅供参考，如有需要，请与 MCE 中国技术支持联系。

免费服务热线：400-820-3792

E-mail：sales@medchemexpress.cn

技术支持电话：021-58950656

技术支持邮箱：tech@medchemexpress.cn

动物实验体内工作液的配制方法 : 取

μL DMSO 储备液，加入

μL 。

μL ，混合均匀至澄清，再加

μL Tween 80，混合均匀至澄清，再加

μL 生理盐水。

将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液

连续给药周期超过半月以上，请谨慎选择该方案。

请确保第一步储备液溶解至澄清状态，从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热（超声清洗仪，建议频次 20-40 kHz），涡旋吹打等方式辅助溶解。

纯度 & 产品资料

纯度: 99.66%

选择批次：

HY-18739-44762

HY-18739-234502

HY-18739-45884

HY-18739-315530

HY-18739-58799

HY-18739-158693

HY-18739-308940

HY-18739-116796

HY-18739-45112

HY-18739-151535

HY-18739-23615

HY-18739-256924

HY-18739-23560

HY-18739-22908

HY-18739-60745

HY-18739-250803

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Cell Assay

[2]

αT3-1 and LβT-2 cells are grown in monolayer cultured in DMEM in humidified incubator 5% CO2 at 37°C. Serum starvation is with 0.1% FCS in the same medium for 16 h. GnRH and PMA are then added for the length of time as indicated. In general, αT3-1 cells are transiently transfected by ExGen 500 or by jetPRIME, while LβT2 cells only by jetPRIME transfection reagent. For experiments with dominant-negative (DN) PKCs, αT3-1 cells (in 6 cm plates) are transfected with 1.5 μg of p38α-GFP with 3 μg of control vector, pCDNA3, or with 3 μg of the DN-PKCs constructs. For LβT2 cells, transfections are performed (in 10 cm plates) with 4 μg of p38α-GFP along with 9 μg of control vector, pCDNA3, or with 9 μg of the DN-PKCs constructs. Approximately 30 h after transfection, the cells are serum starved (0.1% FCS) for 16 h and later stimulated with GnRH or PMA, washed twice with ice-cold PBS, treated with the lysis buffer, followed by one freeze-thaw cycle. Cells are harvested; following centrifugation (15,000×g, 15 min, 4°C) supernatants are taken for immunoprecipitation experiments[2].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Animal Administration

[3]

Rats[3] All experiments qre performed with male Wistar rats (weighing 250-280 g). One hundred and thirty-five Wistar rats are randomly divided into seven groups. (1) Rats in the sham group (n=21) are given a lateral cerebral ventricle injection of 0.9% normal saline; (2) Rats in the IR group (n=21) are given a lateral cerebral ventricle injection of 0.9% normal saline 30 min before middle cerebral artery occlusion (MCAO); (3) Rats in the Carbenoxolone (CBX) group (n=21) are given a lateral cerebral ventricle injection of CBX (5 μg/mL×10 μL) 30 min before MCAO; (4) Rats in the Sch-6783 group (n=21) are given a lateral cerebral ventricle injection of DZX (2 mM×30 μL) 30 min prior to MCAO; (5) Rats in the 5-HD group (n=21) are given a lateral cerebral ventricle injection of 5-HD (100 mM×10 μL), and after 10 min, DZX is injected 15 min prior to MCAO; (6) The rats in the DZX + Ro group (n=15) are given a lateral cerebral ventricle injection of DZX, and after 10 min, Ro-31-8425 (400 μg/kg) is injected 15 min prior to MCAO; (7) The rats in the 5-HD+PMA group (n=15) are given an intraperitoneal injection of PMA (200 μg/kg) after the injection of 5-HD and DZX.

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

参考文献

[1]. Sergio E. Alvarez, et al. Autocrine and paracrine roles of sphingosine-1-phosphate. TRENDS in Endocrinology and Metabolism Vol.18 No.8

[Content Brief]

[3]. Schwende H, et al. Differences in the state of differentiation of THP-1 cells induced by phorbol ester and 1,25-dihydroxyvitamin D3. J Leukoc Biol. 1996;59(4):555-561.

[Content Brief]

[6]. Hou S, et al. Mechanism of Mitochondrial Connexin43's Protection of the Neurovascular Unit under Acute Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury. Int J Mol Sci. 2016 May 5;17(5). pii: E679.

[Content Brief]

[7]. Heng-Ching Wen, et al. PMA inhibits endothelial cell migration through activating the PKC-δ/Syk/NF-κB-mediated up-regulation of Thy-1. Sci Rep. 2018 Nov 2;8(1):16247.

[Content Brief]

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[3]. Schwende H, et al. Differences in the state of differentiation of THP-1 cells induced by phorbol ester and 1,25-dihydroxyvitamin D3. J Leukoc Biol. 1996;59(4):555-561.

[6]. Hou S, et al. Mechanism of Mitochondrial Connexin43's Protection of the Neurovascular Unit under Acute Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury. Int J Mol Sci. 2016 May 5;17(5). pii: E679.

[7]. Heng-Ching Wen, et al. PMA inhibits endothelial cell migration through activating the PKC-δ/Syk/NF-κB-mediated up-regulation of Thy-1. Sci Rep. 2018 Nov 2;8(1):16247.

Phorbol 12-myristate 13-acetate 相关分类

诱导疾病模型产品

免疫与炎症疾病模型

皮肤疾病模型

皮炎模型

Epigenetics

TGF-beta/Smad

Immunology/Inflammation

NF-κB

PKC

SphK

NF-κB

完整储备液配制表

可选溶剂

浓度

溶剂体积

质量

1 mg

5 mg

10 mg

25 mg

DMSO / Ethanol

1 mM

1.6212 mL

8.1060 mL

16.2119 mL

40.5298 mL

5 mM

0.3242 mL

1.6212 mL

3.2424 mL

8.1060 mL

10 mM

0.1621 mL

0.8106 mL

1.6212 mL

4.0530 mL

15 mM

0.1081 mL

0.5404 mL

1.0808 mL

2.7020 mL

20 mM

0.0811 mL

0.4053 mL

0.8106 mL

2.0265 mL

25 mM

0.0648 mL

0.3242 mL

0.6485 mL

1.6212 mL

30 mM

0.0540 mL

0.2702 mL

0.5404 mL

1.3510 mL

40 mM

0.0405 mL

0.2026 mL

0.4053 mL

1.0132 mL

50 mM

0.0324 mL

0.1621 mL

0.3242 mL

0.8106 mL

60 mM

0.0270 mL

0.1351 mL

0.2702 mL

0.6755 mL

80 mM

0.0203 mL

0.1013 mL

0.2026 mL

0.5066 mL

100 mM

0.0162 mL

0.0811 mL

0.1621 mL

0.4053 mL

Help & FAQs

Do most proteins show cross-species activity?

Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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Phorbol 12-myristate 13-acetate16561-29-8PMA TPAPhorbol myristate佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐佛波酯PKCSphKNF-κBProtein kinase CSphingosine kinaseNuclear factor-κBNuclear factor-kappaBInhibitorinhibitorinhibit

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小爱科普：佛波酯(PMA) - 知乎

小爱科普：佛波酯(PMA) - 知乎首发于科研百宝箱切换模式写文章登录/注册小爱科普：佛波酯(PMA)absin爱必信-absin，中国人自己的生命科学百宝箱ΣPMA(TPA)佛波酯是一种广泛用于体内外实验的佛波酯(phorbol ester) PKC激活剂。PMA结合PKC(Ki =2.6 nM)并激活其功能，在细胞和组织中都呈现出极其广的抑制谱。PMA可以抑制Fas诱导的细胞凋亡，但又可以诱导HL-60细胞的凋亡。PMA是一种高效的肿瘤促进剂，可以促进小鼠皮肤瘤的形成。尽管PMA毒性较强，但是在人体内仍显示出抗白血病和抗中性白细胞减少的活性。图一. PMA结构图体外研究：为了检查PKC在p38MAPK磷酸化中的作用，用PKC活化剂PMA（100nM）刺激细胞，其模拟PKC的天然活化剂DAG与PKC的C1区的结合。在与αT3-1细胞中GnRH观察到的类似的两种细胞类型中观察到PMA的p38MAPK磷酸化，即缓慢的持续激活（分别在30分钟时为3.2倍和3.6倍）。由GnRH和PMA激活的PKC在p38MAPK磷酸化中起不同作用的矛盾发现可以通过PKC的差异定位来解释。 αT3-1细胞中p38MAPK磷酸化的基础，GnRH-和PMA-刺激是通过电压门控Ca2 +通道和Ca2 +动员的Ca2 +流入介导的，而在分化的LβT2促性腺细胞中，它仅通过Ca2 +动员介导[2]。体内研究： PMA是PKC激动剂，其逆转由5-羟基癸酸（5-HD）诱导的损伤。因此，mitoKATP的激活通过PKC途径保护SOD和MDA中的线粒体功能[3]。细胞实验参考：αT3-1和LβT-2细胞在补充有10％胎牛血清（FCS）和L-谷氨酰胺2mM，青霉素和链霉素（100单位/ mL）的DMEM中在37℃加湿培养箱中培养5％CO2培养。 C。在同一培养基中血清饥饿为0.1％FCS，持续16小时。然后如所示，将GnRH和PMA添加一段时间。通常，αT3-1细胞通过ExGen 500或jetPRIME瞬时转染，而LβT2细胞仅通过jetPRIME转染试剂转染。对于显性阴性（DN）PKC的实验，用1.5μgp38α-GFP和3μg对照载体，pCDNA3或3μgDN-PKC构建体转染αT3-1细胞（在6cm平板中）。对于LβT2细胞，用4μgp38α-GFP以及9μg对照载体，pCDNA3或9μgDN-PKC构建体进行转染（在10cm平板中）。转染后约30小时，将细胞血清饥饿（0.1％FCS）16小时，然后用GnRH或PMA刺激，用冰冷的PBS洗涤两次，用裂解缓冲液处理，然后进行一次冻融循环。收获细胞;离心（15,000×g，15分钟，4℃）后，取上清液进行免疫沉淀实验[2]。动物实验参考：大鼠[3]所有实验均用雄性Wistar大鼠（体重250-280g）进行。将125只Wistar大鼠随机分成7组。（1）假手术组（n = 21）给予侧脑室注射0.9％生理盐水; （2）IR组大鼠（n = 21）在大脑中动脉闭塞（MCAO）前30 min给予侧脑室注射0.9％生理盐水; （3）在MCAO前30分钟，给予Carbenoxolone（CBX）组（n = 21）大鼠侧脑室注射CBX（5μg/ mL×10μL）; （4）在MCAO之前30分钟，给二氮嗪（DZX）组（n = 21）的大鼠腹侧注射DZX（2mM×30μL）; （5）对5-HD组（n = 21）的大鼠进行5-HD（100mM×10μL）的侧脑室注射，10分钟后，在MCAO前15分钟注射DZX; （6）给DZX + Ro组大鼠（n = 15）注射DZX侧脑室，10分钟后，在MCAO前15分钟注射Ro-31-8425（400μg/ kg）; （7）注射5-HD和DZX后，给5-HD + PMA组（n = 15）的大鼠腹膜内注射PMA（200μg/ kg）。参考文献：[1]. Xu F, et al. Protein kinase C-mediated Ca2+ entry in HEK 293 cells transiently expressing human TRPV4. Br J Pharmacol. 2003 Sep;140(2):413-21. [2]. Mugami S, et al. Differential roles of PKC isoforms (PKCs) and Ca2+ in GnRH and phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) stimulation of p38MAPK phosphorylation in immortalized gonadotrope cells. Mol Cell Endocrinol. 2017 Jan 5;439:141-154. [3]. Hou S, et al. Mechanism of Mitochondrial Connexin43's Protection of the Neurovascular Unit under Acute Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury. Int J Mol Sci. 2016 May 5;17(5). pii: E679. [4]. Zhang T, et al. MPTP-Induced Dopamine Depletion in Basolateral Amygdala via Decrease of D2R Activation Suppresses GABAA Receptors Expression and LTD Induction Leading to Anxiety-Like Behaviors. Front Mol Neurosci. 2017 Aug 7;10:247. 发布于 2020-08-20 14:29细胞生物学pmaTPA赞同 134 条评论分享喜欢收藏申请转载文章被以下专栏收录科研百宝箱absin，您身边的科研

PMA取证入门 - 知乎

PMA取证入门 - 知乎切换模式写文章登录/注册PMA取证入门翱坤科技航空工程适航认证飞行测试数字化一、什么是PMA以及PMA件？零部件制造人批准书(PMA)是中国民用航空地区管理局（简称民航地区管理局）颁发给供安装在经型号合格审定或型号认可审定的民用航空产品（指民用航空器、发动机、螺旋桨，简称产品）上作为替换或改装用零部件的制造人的批准书。PMA件即指上述零部件制造人依据其持有的PMA证书生产的零部件。PMA起源于美国，是美国联邦管理局(FAA)在其特殊的国内行业背景和需求下（大量军机转为民用、老旧航空器备件缺乏等）设立的证件形式，之后被我国以及部分其他国家的民航当局所借鉴。作为对民用航空零部件的一种批准和管理方式，PMA并不像技术标准规定项目批准书(CTSOA或他国同类证件)一样在国际上被普遍应用——例如，欧盟航空安全管理局(EASA)就未设立这一证件，而采用了其它管理形式。随着行业的不断发展和变化，PMA这一证件及其管理要求正变得越来越复杂。我们至少可从以下三个角度来加深对它的理解：（一）不同的设计批准基础设计批准基础（也可简称为批准基础）是指PMA申请人获得设计批准的不同途径。《零部件制造人批准书合格审定程序》(AP-21-AA-2020-13)中规定了4种不同的PMA设计批准基础；设计批准基础不同，PMA的证件性质、审定重点和流程也不同。1、通过权益转让协议证明同一性这是一种设计和生产机构分离的情况。即通过签订权益转让协议，PMA申请人从国内外（包含安装批准的）设计批准持证人(DAH)处获得使用其设计资料用于批量生产的授权。注：如依据的是国外DAH的授权来申请PMA，即设计和生产跨国分离的特殊情况，还需满足以下两个前提条件：第一、权益转让人所在国（设计国）与我国应已经签订包含支持两国间此类活动的适航协议；第二、拟进行权益转让的设计已经获得我国局方的设计批准或认可（如型号认可证VTC、补充型号认可证VSTC等）。这种PMA件与“原件”（OEM件）从设计上来讲来源相同、完全一致，只是制造人不同；在DAH（也即OEM）同意的情况下，此类PMA件甚至可以采用与OEM件同样的件号。2、补充型号合格证或改装设计批准书即申请人基于自己持有的补充型号合格证(STC)或改装设计批准书(MDA)，向民航地区管理局提出PMA申请。区别于上一种设计、生产机构分离的情况，这种情况下STC/MDA、PMA的持有人是同一机构，但设计和生产证件是分离的——STC/MDA作为改装包的设计批准，PMA仅作为该改装包的生产批准。此类PMA件的安装适用范围及使用限制必须与STC或MDA保持一致。3、在没有权益转让协议的情况下证明同一性基于这种设计批准基础的申请人，必须能够向局方证明其所申请的PMA件在设计的所有方面均与某一经局方批准装机的零部件（被替换件）完全或本质上一致（即“同一性”）。但通常在没有权益转让协议的情况下证明同一性是很困难的，可能的情况主要有两种：一种是申请人本身就是某一DAH的设计供应商，拥有该件的所有设计资料，拟在没有DAH支持的情况下自行申请PMA（区别于本小节第１种情况）；另一种情况是拟申请的PMA件特别简单，申请人可以通过逆向工程和对比分析方法完成设计并向局方表明其所申请的PMA件与OEM件完全一致。此外，此类PMA持有人必须在证后持续保持对被替换件的“同一性”，比如，不能开展会影响“同一性”的证后设计更改。4、通过试验和计算进行符合性验证基于这种设计批准基础的PMA件是最常见的。申请人通常采用逆向工程等方法开展设计，并通过试验和计算直接向局方表明其所申请的PMA件完全满足拟装产品审定基础中的适用要求。（二）不同的证件性质虽然在《民用航空产品和零部件合格审定规定》（CCAR-21-R4）中未作明确和细化，但根据AP-21-AA-2020-13：基于“通过权益转让协议证明同一性”和“补充型号合格证或改装设计批准书”这两种批准基础获得的PMA仅作为生产批准；而“在没有权益转让协议的情况下证明同一性”和“通过试验和计算进行符合性验证”的PMA是设计和生产的双重批准。特别对于“通过权益转让协议证明同一性”这种情况，PMA件的设计批准和生产批准的持有人是不同机构，分别承担不同的持续适航责任。（三）PMA件的不同用途从用途角度，PMA件又可分为替换件和改装件两种类型：替换件能够直接替换某一已经随型号合格审定或型号认可审定获得批准的件（被替换件）——从设计上讲，替换件能够从装配、外形和功能(3F)方面替代被替换件。此类PMA件的安装适用范围除可安装的产品型别（至少一个）信息外，还必须明确被替换件——必要时应表明其在相应产品上的安装位置。改装件则指不包含在产品的原始型号设计中，而是通过对产品进行设计大改或小改获得批准的零部件，其常见的设计批准基础是STC或MDA。值得注意的是，上述两种类型在某些特殊情况下是可以重合的，也就是说，某一PMA件可能既是改装件又是替换件。二、PMA件合法吗？1、通过“仿制”取得的PMA合法吗？大量PMA件，特别是通过试验和计算进行符合性验证的PMA件，都是采用逆向工程方法对OEM件进行“仿制”而成，这种做法是否侵犯了OEM的知识产权、进而导致PMA件不合法呢？应该认识到，“逆向工程”/"仿制"绝不等同于违法！这本身是个复杂的法律问题，并不能一概而论、需要具体情况具体分析。比如，通过技术手段对从公开渠道、合法取得的产品进行拆卸、测绘、分析等而获得该产品的有关技术信息通常不违法，但若采用非法手段获取他人商业秘密，或未经许可使用他人已注册的商标或专利则可能造成违法。但“知识产权”并非适航问题、也不属于审定局方的职权范畴。申请人应根据《中华人民共和国专利法》、《中华人民共和国反不正当竞争法》等适用的法律法规，自行确认自己的此类行为不构成知识产权侵犯，然后再来申请PMA。2、使用PMA件合法吗？根据CCAR-21-R4：第21.9条款，零部件的批准方式包括“根据本规定第九章的第21.301条至第21.320条颁发零部件制造人批准书”；而根据第21.10条款，“依据局方的生产批准生产的”替换件和改装件可以安装在在经型号合格审定或者经型号认可审定的产品上。进一步的，根据《合格的航材》(AC-120-FS-058R3)：中国民用航空局（CAAC）批准的PMA件是根据CCAR-21在民航局批准的生产系统制造的、并符合民航局批准数据的部件，属于“民航局批准的部件”；而进口的全新PMA件（如FAA PMA件），若属于根据CCAR-21部及双边适航协议认可的其他民航局批准的生产制造体系生产的零部件，则是“民航局认可的部件”。综上可知，PMA件是经局方批准/认可的，当其具备满足局方要求的适航/出口适航批准标签、标识和可追溯性信息时，就视为合法的航材，可以在经局方批准的范围和限制内，在经型号合格审定和认可审定的产品上、作为替换件或改装件直接使用，无需获得额外批准。三、申请零部件制造人批准书(PMA)前的准备？1、取证项目是否适用于PMA？从证件适用性的角度来看，零部件制造人批准书(PMA)的适用范围非常广。这种证件几乎适用于拟在某一/某些已经获得设计批准(DA)的民用航空产品上用作替换或改装用途的、能够被明确定义的任何机载零部件。但需注意的是，拟申请作为设计和生产双重批准的PMA时，若所申请零部件是关键件，或该件的安装会对民用航空产品造成设计大改，则不能直接申请PMA，而必须先申请补充型号合格证（STC）。此外，还有一些“不能够”申请PMA的情况（详见AP-21-2020-AA-13），主要包括：单独的软件、材料、程序和工艺，出于销售目的定义的“套件”，存在批产限制的STC/MDA（改装设计批准书）。2、应该了解哪些政策和要求？申请人应提前了解PMA取证的相关政策和要求，至少包括：《民用航空产品和零部件合格审定规定》（CCAR-21-R4) ：合格审定总体要求；注：至少应了解第一章、第六章、第九章、第十二章、第十四章（自愿）中的相关要求。《零部件制造人批准书合格审定程序》(AP-21-AA-2020-13)：PMA的基本概念、证件适用性，合格审定流程，设计审定和证后监管要求；《生产批准和监督程序》(AP-21-AA-2019-31)：PMA生产审定和证后监管要求；拟装民用航空产品的审定基础(见其数据单TCDS/VTCDS)、适用的审定标准（如运输类飞机适航标准CCAR-25）：PMA项目设计审定基础的来源；可获取的“被替换件”及其相关信息（若适用）。注：以上引用的文件均为现行有效版本，若有改版，应以申请之日有效的版本为准。3、确定设计批准基础很多情况下，申请人适用的“设计批准基础”并不唯一。比如，PMA申请人本身就是某一设计批准持证人(DAH)的设计供应商，在能够获得DAH支持的情况下，可采用“通过权益转让协议证明同一性”来申请PMA——如果申请人只打算做批量生产并直接向市场销售，这一路径通常是最优的；但若申请人预期会自行开展一些证后的设计更改、并希望获得这种权利，则也可考虑通过“在没有权益转让协议的情况下证明同一性”或“通过试验和计算进行符合性验证”来申请PMA——而这两种选择中的后者在证后设计更改方面的灵活性会更大一些。因此，申请人应在对相关政策建立了充分理解的基础上，结合项目的具体情况和自己的实际诉求，选择可行且最合适的设计批准路径。4、向谁提交申请？所有PMA项目均由（申请人注册地所属辖区的）民航地区管理局负责受理、审查、颁证和证后管理。新的PMA申请统一采用线上方式，申请人应登录适航审定运行管理系统 (AMOS)https://amos.caac.gov.cn/，注册账号并提交申请。四、零部件制造人批准书(PMA)的合格审定要求？1、PMA合格审定流程仅申请PMA作为生产批准的两种情况：“依据权益转让协议证明同一性”、“基于STC/MDA”，审查的重点在于申请人的生产质量系统；申请PMA作为设计和生产双重批准的两种情况："在无权益转让协议的情况下证明同一性"、"通过试验和计算进行符合性验证"，审查组会开展设计和生产审查。具体的合格审定流程详见AP-21-AA-2020-13，简化的流程图如下：PMA合格审定流程简图2、对PMA的总体要求根据CCAR-21-R4，第21.310条款：PMA申请人和持有人应当“接受局方为了确定符合民用航空规章，实施对设计保证系统（自愿建立的情况下）、质量系统、设施、技术资料和任何生产的零部件的检查，并且目击任何试验，包括在供应商设施进行的任何检验或者试验”；第21.311条款：仅当局方确定申请人具有可接受的设计保证系统（DAS，目前对PMA申请人及持证人不再作为强制要求），符合规章要求且零部件设计符合拟装该零部件的产品适用的民航规章的要求时，才可颁证，批准零部件制造人按第21.308条所规定的质量手册生产PMA件。上述CCAR-21-R4中对PMA件的审查和颁证的总体要求，除DAS外，与对型号合格证(TC)、生产许可证(PC)项目的要求基本一致。3、设计审定要求包含设计批准的PMA项目需要确定审定基础、接受局方的设计审查。PMA项目的审定基础主要与其拟装的民用航空产品挂钩，其确定原则与产品的证后设计更改项目类似——即根据PMA件的安装对拟装产品整体适航性和安全性的影响和程度来决定项目的审定基础：若影响显著，即造成了产品的设计大改，则必须按照CCAR-21-R4第21.101条款优先选用最新版的适航要求作为项目的审定基础；若没影响，或影响不显著、仅造成产品的设计小改，则可采用与产品审定基础一致的或等效的要求。而目前可申请PMA作为设计和生产双重批准的两种批准基础：“在没有权益转让协议的情况下证明同一性”或“通过试验和计算进行符合性验证”，均不会出现对拟装产品造成设计大改的情况（大改要先申请STC），因此：“在没有权益转让协议的情况下证明同一性”的PMA项目，为保证“同一性”，原则应与拟装产品的审定基础完全一致；“通过试验和计算进行符合性验证”的PMA项目，因为只可能是小改，仅需采用与拟装产品审定基础一致或等效的要求；但申请人可自愿或在审查组的特别要求下（部分/全部）采用更新的要求。此外，针对替换件，AP-21-AA-2020-13还要求申请人对被替换件（OEM件）进行安全性评估（关键件要申请STC）和使用经历评估，尤其要关注相关的适航指令和未解决的使用困难，以确认其原始设计不存在安全隐患——这相当于利用OEM件的使用经历对拟申请的PMA件做一次“精选/优选”。故，就审定基础而言，理论上PMA件应至少与拟装产品的要求一致或等效；而对于用作替换的PMA件，设计审定时还增加了一些额外的安全考虑和要求。4、生产审定要求不管基于哪种设计批准基础或所申请零部件作为何种用途，PMA都包含生产批准。生产审定方面，CCAR-21-R4要求PMA申请人和持证人满足第21.137条款，即根据其拟开展的生产活动，建立并保持满足该条款规定的17个要素（AP-21-AA-2019-31程序将其扩展为19个要素）的质量系统——这与民用航空产品主制造商申请PC的要求完全一致。五、市场对于PMA件的担忧虽然从上述审定要求来看，对PMA件的总体要求、设计要求和生产要求与其拟装产品/要替换的OEM件几乎相同，甚至设计方面的要求还要更高一些。但很多用户（如航空公司）仍然会担心与OEM件相比，使用PMA件可能会使航空器整体的安全性及可靠性水平降低，进而导致航空器贬值甚至安全事故。这种担忧有据可依吗？美国批准和使用PMA件的历史最长，我国虽然也批准了不少PMA件，但大多为技术含量不高的内饰件，积累的使用经验和数据相对局限，因此，让我们来看一看美国的情况。20世纪90年代以后，美国的PMA产业蓬勃发展，PMA件大量进入市场后，给民用航空产品的主制造商们(TC/PC持证人)带来了巨大的竞争压力，这些厂家开始联合起来，对政府不断展开游说，声称PMA件对航空安全构成了威胁。美国联邦航空局(FAA)因此展开了针对PMA件的调查和研究，包括对PMA所有相关法规、政策和实际做法进行了彻底核查，还整理、确认了PMA件进入市场后的实际使用情况，最终于2008年8月完成并发布了研究结果，得出如下结论：虽然市场上PMA件的数量大增，但针对这些零部件所颁发的有关设计或符合性缺陷的使用困难报告和适航指令却并未成比例增加，即关于因PMA件而导致故障或不安全情况增加这一指控，研究小组并未发现实质性证据。最后，FAA再次重申，PMA件和OEM件一样，都是经过局方批准的合法航材，可以安全使用。尽管如此，市场上（特别在国内）对于PMA件的担忧从未、也远未停止。因此，作为国产PMA件的制造商，一方面，应结合国家的产业升级战略，努力开拓更多的可PMA领域，将能力从简单件、非关键件逐步扩展到复杂件、关键件，为国内用户提供更多的国产化替代选择；另一方面，还应不断打磨PMA件的品质和可靠性，打消用户顾虑、建立口碑和信任，赢得市场。国产化浪潮之下，国产PMA件未来可期、PMA制造商任重道远。文章或有谬误讨论、合作或转载请联系作者扫描下方二维码添加微信@HuangShuoqiao获取专业的PMA取证和咨询服务编辑于 2022-06-15 10:11证据计算机取证取证赞同 1添加评论分享喜欢收藏申请

PMA的应用 - 知乎

PMA的应用 - 知乎切换模式写文章登录/注册PMA的应用微基生物专注微生态研究与应用基于核酸的分子生物学检测方法，如聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR），能够用于精准地分析样本中微生物的种类和丰度，但是难以区分微生物的存活状态。传统的用于检测样本中活细胞的方法都需要对样本进行培养，但是此类检测方法存在一定的局限性，无法用于检测一些难培养或是不可培养的活细胞。叠氮溴化丙锭（Propidium monoazide，PMA）是一种能与DNA结合的光反应染料，不具有细胞膜渗透性，无法穿透活细胞完整的细胞膜，只能选择性地穿透死细胞受损的细胞膜。进入细胞后，PMA会与DNA双螺旋发生共价交联，进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增，如图1所示。基于PMA的这一特性，通过对PMA处理过的样本进行PCR扩增和测序分析，即可得知样本中微生物的存活状态。图1.PMA的作用原理示意图现在已经有越来越多的文献报道采用了PMA-PCR或PMA-qPCR等方法对样本中的活细胞进行定性或定量分析，下面解读三篇文献。文献一：Andreas N, Katherine ES, Anne KC. Molecular monitoring of disinfection efficacy using propidium monoazide in combination with quantitative PCR. Journal of Microbiological Methods, 2007, Volume 70, Issue 2. 文章采用了PMA-qPCR的方法，对四种常用的灭菌方法进行了效率评估。作者选择了鼠伤寒沙门氏杆菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌和鸟分枝杆菌这四种常见的致病菌，分别采用次氯酸盐、苯扎氯铵、紫外线和加热消毒法进行灭菌处理，并用PMA进行交联处理。将处理好的样本和未经处理的对照样本一起进行基因组抽提，并分别用四株菌的特异引物对样本进行qPCR定量分析。作者还同时对样本进行了平板培养，作为PMA处理效果的对照实验。根据实验结果，次氯酸盐、苯扎氯铵和加热消毒法的灭菌效果都符合预期，PMA-qPCR和平板培养的结果基本一致，部分结果如下图1所示。而紫外线处理的样本经过PMA处理后，qPCR定量结果与未处理对照组的基本一致，如下图2所示，且PMA-qPCR的结果与平板培养的结果之间存在较大的差异，其原因可能是紫外线的灭菌原理是破坏微生物的DNA而非细胞膜，这导致了PMA无法与死细胞的DNA进行共价交联，只有用紫外线进行长时间的照射处理才能破坏细胞膜。图1不同浓度的次氯酸盐对沙门氏菌的灭菌效果。（A）平板计数的结果，横坐标表示次氯酸盐浓度，C为未处理对照。（B）PMA处理后将菌体转移至裂解抽提管中。（C）PMA处理（+）和未处理对照组（-）基因组的凝胶电泳图。（D）qPCR定量结果，纵坐标为未处理对照组和PMA处理组的Ct值差。图2.不同时长的紫外线处理对大肠杆菌的灭菌效果。（A）PMA处理和未处理对照组的qPCR定量结果，横坐标代表紫外线处理时长，纵坐标为Ct值。（B）PMA处理（+）和未处理对照组（-）基因组的凝胶电泳图。文献二：Jialing N, Shingo H, Yin W, et al. Uncovering Viable Microbiome in Anaerobic Sludge Digesters by Propidium Monoazide (PMA)-PCR. Microbial Ecology, 2019, Volume 79.厌氧消化是一种非常高效的污水处理方法，若想维持厌氧消化池的正常运作，就必须首先了解参与消化的微生物种群。本文的作者从多个污水厂采集了污泥样本，分别做了PMA处理和不处理的对照，并进行基因组抽提、16S V3-V4高通量测序和qPCR定量分析。根据qPCR定量的结果，发现用PMA处理过的样本中16S拷贝数少于未处理过的样本，说明在样本中约有10%的死细胞。对高通量结果进行分析，发现用PMA处理过的样本中微生物的种类和多样性要明显少于未处理过的对照样本，如下图1所示，部分细菌在经过PMA处理后相对丰度降低了约90%，如α-变形菌和β-变形菌，这些微生物可以被视为污水处理过程中的残留物；而有些细菌的相对丰度则升高了，如拟杆菌门、绿弯菌门和厚壁菌门的微生物，具体可见下图2。在所有用PMA处理过的样本中，广古菌门、拟杆菌门、δ-变形菌门、绿弯菌门、厚壁菌门、WWE1、螺旋体门、互养菌门和Caldiserica门的微生物占了大多数。图1.样品中的OUT数量、Chao 1指数和香农指数。AKT、NGT、NIT、SEN和TNN分别为5个不同的取样地点。DS为厌氧消化池中的淤泥样本，DS-PMA为用PMA处理过的厌氧消化池淤泥样本。图2.PMA处理后样本中部分微生物门水平相对丰度的变化。黑字表示相对丰度增加，红字表示相对丰度减少。文献三：Lanxin M, Jie Y, Hao J, et al. Investigating the bacterial microbiota of traditional fermented dairy products using propidium monoazide with single-molecule real-time sequencing. Journal of Dairy Science, 2019, Volume 102, Issue 5.乳制品在游牧民族中是一类颇受欢迎的食品，而发酵类乳制品中的微生物，尤其是乳酸菌，能够提高乳制品的外观和口感。过去对于乳制品中微生物的鉴定往往采用培养法，但是此方法不仅费时费力，对于一些苛养菌（fastidious microbes）的检测效果也不是很理想。本文的作者对多种传统发酵乳制品进行了采样，使用PMA与三代测序结合的方法，对样本中的活菌和死菌分别进行了分析。作者同时还采用了传统的培养法对样本中的微生物进行分离和鉴定。分析测序结果，发现乳酸杆菌的相对丰度在所有样本中都是最高的。部分样本在经过PMA处理后，乳酸杆菌的相对丰度都有所提高，链球菌的相对丰度则有所下降；另外一些样本中则是肠杆菌的相对丰度提高了，而乳酸杆菌的相对丰度发生了下降，具体可参考下图1。对比PMA处理的结果和传统培养法的结果，作者发现使用PMA处理的方法可以检测到一些使用培养法检测不到的痕量微生物，如清酒乳杆菌和肠膜明串珠菌。图1.传统发酵乳制品中微生物分布的柱状图，上图为属水平分布图，下图为种水平分布图。KM、KIM和CM分别代表3种不同的乳制品样本，PKM、PKIM和PCM为相对的PMA处理样本。微基生物现在也开发出了一套对样本进行PMA处理和高通量/qPCR定量分析的系统，能够对样本中的活菌进行较为精准地定性和定量分析。发布于 2022-06-17 15:09Q-PCRpma定量分析赞同添加评论分享喜欢收藏申请

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Introduction

Stimulation reagents, phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), ionomycin, brefeldin A, and monensin are useful to activate transcription factors for intracellular signaling and production of cytokines of many different immune cell types. Brefeldin A solution is required for intracellular retention of signaling proteins and cytokines. Brefeldin A is an inhibitor of intracellular protein transport. Incubation of cells in culture with brefeldin A leads to blockade of protein transport to the Golgi complex (GC) and accumulation of proteins in the endoplasmic reticulum (ER). Addition of brefeldin A during the last hours of in vitro activation of cells results in enhanced detection of intracellular cytokines. If performing an immunoassay on secreted protein (e.g., ELISA, western or multiplex protein detection), cells do not require treatment with brefeldin A.Materials

T25 or T75 sterile flasks with vented caps (e.g., Nunc EasYFlask Cell Culture Flasks, T25, filter, Cat. No. 156367)RPMI 1640 medium (e.g., BenchStable RPMI 1640 Medium, Cat. No. A4192301)Fetal Bovine Serum (e.g., Gibco Fetal Bovine Serum, Cat. No. 26140079)Cell Stimulation Cocktail: phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), ionomycin, brefeldin A, and monensin (e.g., Invitrogen Cell Stimulation Cocktail with or without protein transport inhibitors, Cat. No. 00-4975-93 or 00-4970-93)Brefeldin A solution (e.g., eBioscience Brefeldin A solution, Cat. No. 00-4506-51)Cell scraper (e.g., Nunc Cell Scrapers, Cat. No. 179693)Procedure

Using aseptic techniques under sterile conditions, isolate PBMC from whole blood (supplemental protocol A) or prepared lymphoid tissue (supplemental protocol B).Prepare complete RPMI 1640 medium by supplementing RPMI 1640 Medium with fetal bovine serum to a final concentration of 10%. Bring medium to 37°C.Resuspend cells to a concentration of 3 x 106 cells/mL in complete RPMI 1640 medium. Prepare the volume needed based on the flask size you will be using (T25 or T75).Prepare 2 culture flasks: one labeled ‘stimulated’ (activated) and the other as ‘non-stimulated’ (non-activated).Divide the cell solution (prepared in step 3) evenly into the prepared flasks.Add Cell Stimulation Cocktail at a concentration of 1X, 2 µL/mL into the stimulated (activated) flask.Add Brefeldin A solution at a concentration of 1X, 3 µL/mL to each of the stimulated and non-stimulated flasks.Cover both flasks with vented filtered caps, and incubate for 5 hours in 5% CO2 incubator at 37°C.Harvest cells with a cell scraper.Protocol tip:Use of ready-made

fixation buffers can help improve detection of cytokines and transcription factors in flow cytometry applications.

Supplemental protocol A: isolation of PBMC from whole blood

Materials

Phosphate buffered saline (e.g., Gibco PBS (10X), pH 7.4, Cat. No. 70011044)15 mL or 50 mL conical tube (e.g., Nunc 15 mL conical sterile centrifuge tubes, Cat. No. 339650)Ficoll-Paque® density separation mediumFlow cytometry staining buffer (e.g., eBioscience Flow Cytometry Staining Buffer, Cat. No. 00-4222-26)

Procedure

Dilute blood sample at least 1:1 with PBS in a conical tube.Underlay the diluted sample with a volume of Ficoll-Paque® medium that is equal to the original sample volume.Centrifuge at 400 x g for 20 minutes at room temperature with the brake OFF.Harvest PBMC located at the interface of the PBS and Ficoll-Paque® medium layers into a fresh tube.Fill the tube with PBS to wash the cells.Centrifuge the cells at 300–400 x g for 4–5 minutes at 2–8°C. Discard supernatant.Resuspend the cell pellet in an appropriate volume of flow cytometry staining buffer or buffer of choice, and perform a cell count and viability analysis.Centrifuge cells as in step 6, and resuspend in appropriate volume of complete RPMI 1640 so that the final cell concentration is 3 x 106 cells/mL.Note: As cells will be cultured, perform all steps using aseptic technique, and use buffers that do not contain azide.

Protocol tip: Significantly improve the accuracy of assessing cell health and concentration from freshly harvested peripheral blood mononuclear cells with automated counters.

See detailed protocol on how to count PBMC using the

Countess II FL Automated Cell Counter.

Supplemental protocol B: isolation of immune cells from lymphoid tissue

Materials

60 x 15 mm cell culture dish (e.g., Nunc Cell Culture Petri Dishes, Cat. No. 150340)Plastic 3-mL syringe or two frosted glass microscope slidesCell strainer (nylon mesh)15 mL or 50 mL conical tube (e.g., Nunc 15 mL conical sterile centrifuge tubes, Cat. No. 339650)Flow cytometry staining buffer (e.g., eBioscience Flow Cytometry Staining Buffer, Cat. No. 00-4222-26)

Procedure

Harvest tissue (spleen; thymus; lymph nodes) into a cell culture dish containing 10 mL of Flow Cytometry Staining Buffer or buffer of choice. Tease apart into a single-cell suspension by pressing with the plunger of a 3 mL syringe. Alternatively, mash tissue between the frosted ends of two microscope slides using 10 mL of Flow Cytometry Staining Buffer.Place a cell strainer on top of a 15-mL conical tube. Pass cells from the cell culture dish through the cell strainer to eliminate clumps and debris.Centrifuge cell suspension at 300–400 x g for 4–5 minutes at 2–8°C. Discard the supernatant.Resuspend the cell pellet in an appropriate volume of Flow Cytometry Staining Buffer or buffer of choice and perform a cell count and viability analysis.Centrifuge cells as in step 3, and resuspend in appropriate volume of complete RPMI 1640 medium to the final cell concentration is 3 x 106 cells/mL.Note: Mechanical disruption of lymphoid tissue is generally sufficient to release cells into a single-cell suspension.

Note: As cells are to be cultured, perform all steps using aseptic technique, and use buffers that do not contain azide.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

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丙二醇甲醚醋酸酯（PMA）的特性各位大神知道么？ - 知乎首页知乎知学堂发现等你来答切换模式登录/注册物理化学丙二醇甲醚醋酸酯（PMA）的特性各位大神知道么？求大神指导丙二醇甲醚醋酸酯（PMA）的特性，比如：危险特性、接触后表现、现场救急措施、个体防护措施、泄漏处理及防火防爆措施、最高容许浓度。谢谢啦，小妹…显示全部关注者3被浏览3,994关注问题写回答邀请回答好问题添加评论分享2 个回答默认排序lzl苦逼化工狗关注这种事情，百度还快些吧http://www.alfachina.cn/AlfaAesarApp/getpdf?contentId=ZH_CN_MSDS_L15459发布于 2015-12-03 16:21赞同 2添加评论分享收藏喜欢收起Hefei Refine瑞环为您解决溶剂从使用到排放为止的一系列问题关注丙二醇甲醚乙酸酯Material Safety Data Sheet/ 物质安全资料表第一部分化学品及企业标识化学品中文名称：丙二醇甲醚乙酸酯化学品俗名或商品名：PMA化学品英文名称：2-Acetoxy-1-methoxypropane企业名称：瑞环(合肥)环境有限公司地址：合肥市肥东县合肥循环经济园乳泉路北侧邮编：231614电子邮件地址：合肥市肥东县合肥循环经济园乳泉路北侧传真号码：0551-67600383企业应急电话： 0551-67600280生效日期： 2018.5.4国家应急电话：事故应急救援（021）62533429(F), FAX(021)62563255 , 火警 119第二部分成分/组成信息化学品名称：丙二醇甲醚乙酸酯有害物成分：丙二醇甲醚乙酸酯浓度：≧99.5%CAS No.：108-65-6第三部分危险性概述危险性类别：第 3 级易燃液体侵入途径：吸入，皮肤接触，食入。健康危害：眼睛：过多接触会刺激眼睛。皮肤：长期或经常性接触会引发皮炎，如起水疱、裂口、水肿和/或皮肤发红、。食入：会引发眩晕、恶心和/或刺激。吸入：吸入浓度大的本品会引发头痛、眩晕、神经混乱和/或恶心。长期吸入：对肾脏有损伤。环境危害：无资料燃爆危险：本产品易燃，闪点为 48℃第四部分急救措施皮肤接触：脱去污染的衣着，用水冲洗皮肤。眼睛接触：用大量水冲洗，严重者就医吸入：脱离污染区，到空气新鲜处休息并保暖，严重者就医。食入：除非在医生直接指导下，否则请勿进行催吐。然后立即就医第五部分消防措施危险特性：易燃，闪点为 48℃有害燃烧产物：碳氧化物灭火方法及灭火剂：灭火程序： 1.将所有人员隔离危险区。2.消防员应穿相应的消防服，如通常救火一样。适用灭火剂：水、泡沫、化学干粉和二氧化碳。灭火注意事项：消防员应穿相应的消防服，如通常救火一样。第六部分泄漏应急处理应急处理：个人应注意事项：1.在污染区尚未完全清理干净前，限制人员接近该区。2.穿戴适当的的个人防护装备。环境注意事项：避免泼洒到下水道、水道或地势低的地方。消除方法：对于少量的泼洒，用可吸收的材料吸干或擦除，然后置于化学废料容器内。对于大量的泼洒，筑防护栏或围住液体，并收集到容器中。不要排放到下水道或水道。然后用废抹布擦拭泼洒区。第七部分操作处置与储存操作注意事项：仅在通风良好的地方或露天使用，不能吸入蒸汽，尽量在顺风处操作。避免眼睛、皮肤或衣服接触到本品，注意要戴上相应的防护装备。避免泄漏、溢流或泼洒。避免操作不小心或滴落及防止实物损坏。储存注意事项：存放于阴凉、避免阳光直射、通风良好的地方。容器密封存放。远离热源、火焰，火花或太阳光直接照射的地方。、第八部分接触控制/个体防护最高容许浓度： 0.54mg/L监测方法：大气采样器采样，色谱检测工程控制：生产场所应通风，杜绝明火，电气设备应采取防爆措施。呼吸系统防护：当出现大量泄漏时抢险人员应穿戴过滤式防毒面具。眼睛防护：化学安全防护眼镜。身体防护：一般作业防毒服。手防护：橡胶手套，乳胶手套。其他防护：推荐尽量在足够通风的情况下使用第九部分理化特性外观与性状：无色透明液体，有微弱芳香酯的气味。pH 值： --熔点（℃）： --67℃相对密度（水=1）： 1.027（25℃/4℃）沸点（℃）： 148-151 ℃相对蒸气密度（空气=1）：4.6饱和蒸气压（kPa）：3.7 mmHg (0.49 kPa) （20℃）燃烧热（kJ/mol）：--临界温度（℃）：---临界压力（MPa）：--闪点（℃）： 51 ℃爆炸上限％（V/V）： 7.0引燃温度（℃）： 346℃爆炸下限％（V/V）： 1.5溶解性：可溶于水，易溶于各种有机溶剂。其他理化性质：--第十部分稳定性和反应活性稳定性：在常规及预期储存或操作条件下稳定。。禁配物：强氧化剂、强酸避免接触的条件：明火，火花，静电，引燃源，湿气。聚合危害：无资料分解产物：燃烧时可生成碳氧化物。第十一部分毒理学资料急性毒性：食入：食入的毒性非常低。雌性大鼠经口 LD50：8532 mg/kg。偶然吞咽少量或在正常操作情况下，都不会造成伤害，大量吞咽可能造成伤害。皮肤：兔经皮吸收 LD50：>5000 mg/kg。长期皮肤接触较大剂量可能引起嗜睡。吸入：一次接触蒸气无不利影响。亚急性和慢性毒性：不明刺激性：不明致敏性：无第十二部分生态学资料生态毒性：丙二醇甲醚醋酸酯对水中生物基本上无急毒性。LC50 (鱼类): >100 mg/LEC50(水中无脊动物): 100 - 180 mg/l*生物浓缩系数(BCF): 小于 100生物降解性：丙二醇甲醚醋酸酯相当容易被生物分解生物富集或生物积累性：无非生物降解性：不明其他有害作用：--第十三部分废弃处置废弃物性质：危险废物参考相关法规处理。依照仓储条件储存待处理的废弃物。可采用特定得焚烧或卫生掩埋法处理。第十四部分运输信息危险货物编号：无资料UN 编号： 3272（酯类）包装标志：无资料包装类别：3包装方法：无资料运输注意事项：遵守本国所有规定。运输时，检查容器是否泄漏，并正确装入容器中。第十五部分法规信息法规信息：危险化学品安全管理条例 (国务院令第 344 号)使用有毒物品作业场所劳动保护条例(国务院令第 352 号)工作场所安全使用化学品规定([1996]劳部发 423 号)化学品分类和危险性公示通则(GB13690-2009)第十六部分其他信息参考文献：《中华人民共和国公安部消防局防火手册》上海科学技术出版社，1992。徐克力《精细有机化工原料及中间体手册》化学工业出版社，1998 。张维凡《常用化学危险品安全手册》中国医学科技出版社，1992。任在鸣《实用职业卫生手册》重庆出版社，2002。制表单位：瑞环(合肥)环境有限公司修改说明：第一版无修改制单日期：2018-5-4有效期：5 年免责声明：本MSDS的信息仅适用于所指定的产品，除非特别指明，对于本产品与其它物质的混合物等情况不适用。本MSDS只为那些受过适当专业训练的该产品的使用人员提供产品使用安全方面的资料。本MSDS的使用者，须对该MSDS的适用性作出独立判断。由于使用本MSDS所导致的伤害，本MSDS的编写者将不负任何责任。发布于 2022-08-16 13:41赞同添加评论分享收藏喜欢收起

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